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白三葉草花葉病毒(CMV)ELISA檢測試劑盒實驗操作步驟
更新時間:2020-02-26   點擊次數(shù):1379次

 白三葉草花葉病毒(CMV)ELISA檢測試劑盒操作步驟

  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  設置標準品孔、樣本孔和空白孔,空白孔什么都不加;標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  待測樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;
  隨后標準品孔和樣本孔中(空白孔不加)加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
  所有孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  所有孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
結(jié)果判斷

 繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。

試劑盒性能

1.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值,大于等于0.9900。

2.  靈敏度:zui低檢測濃度小于1.0 pmol/L。

3.  特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應。

4.  重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

5.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

 

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